La reserpina aumenta la expresión de BDNF y PCNA, y disminuye la de caspasa-3, en células intersticiales (células de Leydig) de ratas / Reserpine increases BDNF and PCNA expression, but decreases caspase-3, in rat interstitial cells (Leydig cells)

La reserpina es un antipsicótico e hipotensor arterial que reduce significativamente los niveles de monoaminas centrales, y también es utilizada para modelar los cuadros depresivos humanos en animales de laboratorio. Este trabajo estudió, en ratas Wistar machos adolescentes, cómo la reserpina afecta indicadores moleculares de la función testicular, la cual se ha visto alterada en humanos deprimidos. Una semana luego de finalizado el tratamiento con reserpina (4 dosis de 0,0 o 1,0 mg/Kg, cada 2 días) la respuesta ansiosa y depresiva fue evaluada en un laberinto en cruz elevado. Posteriormente, se sacrificaron los animales y disecaron los testículos, los cuales fueron fijados e incluidos en bloques de parafina de donde se obtuvieron cortes histológicos de 6 µm de espesor. Estos se utilizaron para medir el diámetro de los túbulos seminíferos y para medir por inmunohistoquímica el porcentaje de células intersticiales (células de Leydig) positivas a (1) Factor neurotrófico derivado del cerebro, (2) antígeno nuclear de células en proliferación (BDNF y PCNA, respectivamente, por sus siglas en inglés), y a (3) caspasa-3. Se obtuvo también un índice de positividad al receptor de andrógenos en las células intersticiales. La expresión del receptor de andrógeno fue evaluada utilizando una escala semicuantitativa de escores (0, 1, 2 y 3) y el resto de las moléculas por presencia o ausencia de expresión de cada antígeno investigado en 300 células por preparado. Los resultados comportamentales indicaron alteraciones en la respuesta de ansiedad y una significativa depresión motora (e.g., mayor latencia en conductas de escape del sector blanco) en los animales tratados con reserpina. No se observaron diferencias en los diámetros de los túbulos seminíferos ni en la expresión del receptor de andrógeno, mientras que sí se encontró mayor proporción de células intersticiales positivas a BDNF y PCNA, y menor proporción de células positivas a caspasa-3, en los animales tratados. Los resultados corroboran la capacidad de la reserpina para reproducir rasgos comportamentales de la depresión. La administración de la droga, sin embargo, no parece reproducir a nivel testicular los efectos deletéreos encontrados en humanos deprimidos, e incluso los resultados sugieren que la reserpina puede mejorar algunos aspectos de la funcionalidad testicular relacionadas con la actividad de las células intersticiales en ratas.

Reserpine, a drug that depletes central monoamines, has been used as an antipsychotic and arterial hypotensive, and to model depression in animals. The present study analyzed, in adolescent male rats, the effects of chronic reserpine treatment on molecular indexes of testicular function. A week after termination of the treatment (4 doses of 0,0 or 1,0 mg/Kg/every 48 h) the animals were tested for anxiety response and depression patterns in an elevated plus maze. They were then euthanized, their testes dissected, fixed and embedded in paraffin to obtain blocks. Histological sections (6 µm) were obtained and used to measure the diameter of seminiferous tubules and the expression in Leydig cells of Brain-derived neurotrophic factor (BDNF), Proliferating cell nuclear antigen (PCNA), Caspase-3 and androgen receptors, by immunohistochemistry. Behavioral results indicated significant alterations in anxiety responses and a significant motor depression (e.g., greater latency to escape from the white sector). There were no differences between groups in the diameter of seminiferous tubules nor in the androgen receptors positivity. Reserpine-treated animals, however, exhibited more BDNF and PCNA positive cells, and less positive Caspase-3 cells in Leydig cells, than control animals. The results corroborate the efficacy of reserpine to reproduce some of the behavioral components of depression. The drug, however, does not seem to exert in rats the same effects on testicular function that have been found in humans diagnosed with depression. Furthermore the drug seems to enhance some aspects of testicular function related to Leydig cells function in rats.

Consumo de alcohol en ratas adolescentes tratadas con reserpina y fluoxetina / Alcohol consumption in adolescent rats treated with reserpine and fluoxetine

RESUMEN Si bien se ha estudiado el vínculo entre los trastornos de estado de ánimo y el consumo de alcohol, tanto en humanos como en animales, todavía no es del todo claro cómo se da esta relación, y menos aún durante la adolescencia. La administración de reserpina, un depletor de monoaminas, es un modelo ampliamente utilizado en roedores adultos para inducir comportamientos asociados a depresión, pero se desconoce su utilidad en otras etapas del desarrollo. En este trabajo validamos este modelo en ratas adolescentes y posteriormente estudiamos el consumo de alcohol en estos animales, así como su modulación por antidepresivos. En el experimento 1 se administró reserpina (0.0 o 1.0 mg/kg, durante 4 días, IP) a ratas Wistar machos de 30 días. El consumo de alcohol fue evaluado luego de observar comportamientos asociados a depresión e indagar indicadores neuroendocrinos de esta patología. En el experimento 2 los animales recibieron reserpina, seguida por el antidepresivo fluoxetina (0.0 o 10.0 mg/kg, durante 4 días, IG), y luego se evaluó el consumo de alcohol. Los resultados mostraron que la reserpina aumentó significativamente los comportamientos asociados a depresión y alteró los niveles de dopamina en la corteza insular y de hormonas tiroideas en sangre. En la prueba de consumo de alcohol los animales deprimidos, pero no los controles, mostraron un incremento en el consumo a través de los días. El segundo experimento replicó parcialmente este perfil, y no se observó un efecto significativo del antidepresivo en el consumo de alcohol. Los resultados indican que la reserpina es útil para modelar en ratas adolescentes comportamientos asociados a depresión. Se encontró una relación entre este estado y el consumo de alcohol, que no se pudo revertir con antidepresivos.

ABSTRACT The relationship between mood disorders and alcohol consumption has been studied in humans and animals, although it is still not fully clear how this relationship unfolds, much less during adolescence. The administration of reserpine -a monoamine depletor- is an approach traditionally used in adult rodents to induce depression-associated behaviours, but its usefulness in other developmental stages is still unknown. In this study, this model was evaluated in adolescent rats in order to study alcohol consumption, as well as its modulation by antidepressants in these animals. In Experiment 1, 30 day-old male Wistar rats were treated with reserpine (0.0 or 1.0 mg/kg, for4 days, IP). Alcohol consumption was tested after observing depression-associated behaviours and assessing neuroendocrine indicators of this pathology. In Experiment 2, the rats were administered reserpine followed by an antidepressant (fluoxetine, 0.0 or 10.0 mg/kg, for 4 days, IG). Alcohol consumption was then tested. The results showed that reserpine significantly increased depression-associated behaviours and altered insular dopamine and thyroid hormone levels. Alcohol consumption tests showed that reserpine-treated animals -but not control animals- increased their consumption throughout the days. The second experiment partially replicated this profile, and no significant effect of antidepressants was observed in alcohol consumption. The results show that reserpine is instrumental in modelling depression-associated behaviours in adolescent rats. A relationship was found between this condition and alcohol intake, which could not be reversed by antidepressants.